Стадия минерализации

Сжигание по Кьельдалю превращает соединения азота в соединения аммиака.

Цель минерализации — разрушить связи, удерживающие полипептиды вместе, и преобразовать их в более простые молекулы (такие как вода, углекислый газ и сульфат аммония). Эти реакции могут быть ускорены за счет температуры, используемой во время разложения по методу Кьельдаля (чем выше используемая температура, тем быстрее может быть проведена минерализация), а также за счет присутствия кислот, солей и катализаторов (селен, медь, титан). Пары, выходящие из трубок, удаляются вакуумным насосом JP который рециркулирует воду и удаляются в скруббере SMS. Эта конфигурация оптимизирует эффективность работы. Избегайте использования установок для минерализации по методу Кьельдаля без вытяжных систем: это значительно сократит срок их службы и может привести к серьезному ущербу. Это самый трудоемкий этап анализа.

Рекомендации по взвешиванию образцов
Если образец твердый, взвесьте приблизительно 1–3 г образца в лодочке для взвешивания VELP (без азота) (CM0486000 или CM0486001) и запишите вес (для получения лучших результатов размеры частиц образца должены быть менее 1 мм. Перед любой операцией может потребоваться гомогенизация образца).
Если образец жидкий, измерьте объем пипеткой, поместите его в химический стакан и перемешайте с помощью одной из нагревательных мешалок VELP . Перед измерением объема, при необходимости, удалите CO2 (например, газированные напитки).

Добавьте образец, кислоту и катализатор в пробирку
Поместите образец в наиболее подходящую пробирку VELP вместе с 12–20 мл концентрированной серной кислоты, как указано в методе. Общее количество кислоты, необходимое для минерализации по методу Кьельдаля, может варьироваться в зависимости от образца. Еще одним фактором, который следует учитывать, является потеря кислоты, которая происходит из-за испарения через вытяжную вентиляцию. Вытяжная вентиляция VELP и теплозащитный экран контролируют потерю кислоты (около 1,2 мл кислоты на образец).
Добавьте таблетки катализатора KjTabs^TM в соответствии с требованиями официальных методов. Медные катализаторы приемлемы, но реагируют очень медленно. Селеновые катализаторы обычно реагируют очень быстро и используются для веществ, устойчивых к расщеплению по методу Кьельдаля (например, жиры и масла).

Установка программы в дигесторе
Температурные и временные рампы имеют важное значение для корректного проведения этапа минерализации, и мы настоятельно рекомендуем следовать официальным методам. В большинстве методов необходимо установить 2 или 3 линейных изменения температуры.
Выберите программу в меню установки для минерализации по методу Кьельдаля (на DKL предустановлены наиболее часто используемые приложения, а другие устанавдиваются пользователем). Просто нажав «Меню», «Программы», вы можете выбрать стандартную программу или создать новую настраиваемую программу.
Опустите образцы (автоматически на установках для минерализации по методу Кьельдаля DKL) в алюминиевый нагревательный блок (не требующий обслуживания и очень прочный) и нагрейте смесь до температуры, указанной в стандартном методе. (Алюминиевый нагревательный блок DKL обеспечивает максимально возможную гомогенность во всех пробирках и полную минерализацию по методу Кьельдаля в каждой пробирке. Температура может достигать 450 °C / 842 °F, обеспечивая извлечение азота выше 99 %).

Минерализация и охлаждение
Нагревайте смесь в течение времени, указанного в стандартном методе, чтобы получить прозрачный и бесцветный раствор. Во время этой фазы серная кислота вступает в реакцию с образцом, превращая весь азот в органической форме в неорганическую форму, стабильную и готовую к анализу.

H₂SO₄ + Органический N → (NH₄)2SO₄+ CO₂ sub> + H₂O + другие соединения

Если во время минерализации по методу Кьельдаля возникают какие-либо проблемы и/или подготовка проб была выполнена неправильно, оператор может заметить наличие углеродистых остатков (черно-коричневого цвета) в разложенной смеси и на стенках пробирок. Это признаки неполной минерализации образца, который не может быть обработан дальше.

Поднимите образцы (автоматически на установках DKL для минерализации по методу Кьельдаля) и охладите их за счет естественного рассеивания. Отделите всасывающий колпачок (нажмите стрелку вверх на установках для разложения по методу Кьельдаля DKL) — под всасывающим колпачком необходимо установить поддон для сбора капель кислоты, которые могут упасть со стеклянных колпаков.

Теперь штатив для пробирок можно снять, и образцы готовы к перемещению на этап дистилляции.