蒸馏和滴定

蒸馏将硫酸铵（固体）中的氮气转化为氨气（气体）。

存在于消化样品中的硫酸铵被转化为氨气，加热并蒸馏。氨气被冷凝至硼酸接受液中，溶解并再次成为铵离子。使用凯氏蒸馏法，亚硝酸盐和硝酸盐不会被检测出来。为了量化这些元素，在凯氏蒸馏阶段之前，需要对样品进行还原（使用 Devarda 合金）。
VELP 凯氏蒸馏装置提供了不同的自动化水平，从入门级的蒸馏到带有自动试剂添加和残留物自动排出的蒸馏，再到带有集成比色法滴定的全自动系统。

蒸馏步骤

蒸馏
在装有消化样品的试管中加入蒸馏水或去离子水来稀释样品（在UDK139和UDK149蒸馏装置和UDK159自动凯氏定氮仪上自动添加），这样更容易检测到所有的氨。

通过对消解管中导入蒸馏（UDK 139和UDK149蒸馏装置和UDK 159自动凯氏定氮仪的蒸汽输出调节为10-100% ），以便从碱性溶液中蒸馏出氨气。

氨的冷凝和接收
将蒸馏后的蒸汽截留在25-30ml 的Vreciver^TM硼酸溶液中（在UDK 149 凯氏蒸馏装置和UDK 159自动凯氏定氮仪上自动添加），以截留所有的氮气，消除损失的风险。

(NH₄)2SO₄ +2NaOH→2NH₃ +Na₂SO₄ +2H₂ONH₃ +H₃BO₃ →NH₄H₂BO₃ +H₃BO₃

蒸馏结束后，排出消解管中的废液（在UDK139和UDK149 蒸馏装置和UDK159自动凯氏定氮仪自动）。

滴定

现在可以对样品中蒸馏出的氨进行最后的滴定，考虑到如果样品中的氮含量较高，需要用高浓度的酸进行滴定。另一种解决方法是减少分析用样品的数量，但在某些情况下，可能会造成误差，给出错误的结果。

滴定法用于测定消化液中蒸馏出的氨量，从而计算出凯氏氮或蛋白质量，单位为%。

2NH₄ H₂BO₃ +H₂SO₄ → (NH₄)2SO₄ +2H₃BO₃

自动比色法滴定(UDK 159, UDK 169)

VELP Vreceiver™ 是一种经过认证的配方，由硼酸粉和AOAC方法提到的指示剂混合物（溴甲酚绿 和 甲基红）组成，可以快速和标准化地制备用于比色滴定的接收液。
在没有氨气的情况下，颜色是红色的，在有大量氨气的情况下，颜色变成绿色，在分析结束时，颜色变成灰色/粉红色。
将盐酸(HCl)或硫酸(H2SO4)的标准化溶液(滴定剂)放入滴定管中；该溶液将(自动)加入到从样品中蒸馏出的含有氨的有色硼酸中，酸与氨反应。
记录达到终点所需的酸滴定液的体积，并进行最后的计算，获得样品中氮的量，以N%或蛋白质%表示（自动）。